Molekularny defekt prążka 3 białko w owalocytozie południowo-wschodniej Azji ad 10

Nieprawidłowo migrujące peptydy wytworzono zarówno przez cięcie trypsyną, która przecina domenę cytoplazmatyczną białka pasma 3 przy aminokwasie 180, jak i papainę, przy czym miejsce cięcia papainy wynosi około 9000 daltonów od końca N. 19. normalne 13 000-daltonowe i nieprawidłowe 16 000-daltonowe fragmenty barwione specyficznie przeciwciałami skierowanymi przeciwko resztom 142 do 154. W ten sposób wywnioskowano, że uszkodzenie strukturalne znajduje się pomiędzy aminokwasami 60 (możliwe miejsce cięcia papainy) i 180 (miejscem cięcia trypsyną). domena cytoplazmatyczna białka pasma 3. Wykryliśmy także zmiany funkcjonalne w białku pasma 3 charakteryzujące się ścisłym wiązaniem domeny cytoplazmatycznej prążka 3 z ankyriną. Takie ścisłe wiązanie zostało zademonstrowane przez różne podejścia, w tym wiązanie ankyryny z wewnętrznymi pęcherzykami zawierającymi nienaruszone białko pasma 3 i wiązanie ankyryny z rozpuszczalną domeną cytoplazmatyczną białka pasmowego 3. Ponadto, fragment pochodzący z nieprawidłowego pasma 3 był bardziej skuteczny niż jego normalny odpowiednik w usuwaniu anicyny z pęcherzyków wewnątrz-nałogowych w badaniu hamowania kompetycyjnego. Co jeszcze ważniejsze, dostarczamy bezpośrednie dowody na unieruchomienie białka pasmowego 3 w błonach nienaruszonych owalocytów, o czym świadczy wyraźne ograniczenie w ruchliwości bocznej białka pasmowego 3 w badaniu fluorescencji-fotobielenia.
Tak więc, w przeciwieństwie do czerwonych krwinek w innych zaburzeniach związanych z błoną, takich jak eliptocytoza lub sferocytoza, które mają dysfunkcyjne lub niedobór białek szkieletowych błony komórkowej, krwinek czerwonych w owalocytozie południowo-wschodniej Azji są unikalne, ponieważ podstawowy defekt obejmuje raczej niestabilne niż niestabilne białko połączenie, wytwarzające sztywną błonę z czerwonych krwinek. Dwie dotychczasowe postacie pasma 3 opisano wcześniej z wydłużonym końcem N. 45, 46 Oba warianty są jednak prawidłowe hematologicznie, z normalnymi cechami morfologicznymi krwinek czerwonych, a czerwone komórki nie wydają się być odporne na inwazję pasożytów malarii. in vitro.47, 48 Dokładna lokalizacja mutacji aminokwasowych w tych dwóch wariantach pozostaje ustalona i porównana z przypuszczalną mutacją w paśmie owalizacji 3.
Mechanizm, dzięki któremu nadmiernie ciasne wiązanie pasma 3 z ankyrą stanowi ogólny wzrost sztywności błony i prawdopodobnie znacznej oporności owalocytów na inwazję różnych pasożytów pasożytów malarii, jest otwarty do dalszych badań. Ponieważ miejsce kontaktu między domeną cytoplazmatyczną prążka 3 a ankyriną jest regulowane przez fosforylację21 i ponieważ wejście pasożytów malarii do komórek wydaje się wymagać fosforylacji jak dotąd nieokreślonych białek błonowych, 49 dalsze wyjaśnienie roli nieprawidłowego pasma 3 w Oporność na malarię może dostarczyć ważnych wskazówek na temat molekularnych mechanizmów, w których pasożyty malarii wchodzą do komórek i może służyć jako punkt skupienia dla przyszłych interwencji terapeutycznych.
Finansowanie i ujawnianie informacji
Obsługiwane przez granty (HL-27215, HL-37462, HL-32854 i HL-15157) z National Institutes of Health. Prośba o przedruk do Dr. Palka z Wydziału Hematologii / Onkologii, św Elizabeth s Hospital, 736 Cambridge St., Boston, MA 02135.
Jesteśmy wdzięczni dr. Manjit Hanspal, Rajiv Kalraiya i Philip S. Low, pan Donald Howard oraz pani Katarzyna Córgregren za dostarczanie przeciwciał przeciw pasmu 3; Pani Pilarin Nichols i Panu Patrickowi Yacono za pomoc techniczną w przeprowadzaniu eksperymentów; dr Jamesowi Corbettowi za pomoc w obsłudze aparatu fluorescencji-fotowybielacza-odzyskiwania; do pani Gabriella Maitino za przygotowanie rękopisu; i Joan Joos do przygotowania figur.
Author Affiliations
Z Wydziału Hematologii / Onkologii i Katedry Badań Biomedycznych, Szpitalu św. Elżbiety, Wydziału Medycyny Uniwersytetu Tufts University (S.-CL, SZ, JP, TC, PJ); Departamenty Chemii Biologicznej i Farmakologii Molekularnej i Medycyny, Harvard Medical School; oraz Departament Medycyny (Hematology Division), Brigham and Women s Hospital (DEG), wszystko w Bostonie; Mt. Sinai Hospital, Toronto (DA, SB); Uniwersytet w Toronto, Instytut Badań Medycznych, Kuala Lumpur, Malezja (KH, MZ); Papua-Nowa Gwinea Czerwony Krzyż, Boroko (DB); oraz Uniwersytet Papui Nowej Gwinei, Boroko (GTN).

[więcej w: gumtree małopolskie, thyrosan, komórki metaplastyczne ]